[00630077]诱导杜仲悬浮细胞中总黄酮和绿原酸积累的研究

杜仲 (Eucommiaulmiodes)是杜仲科属植物,主要产于四川、陕西、湖北、河南、贵州和云南。为我国特有的第三纪孑遗植物种。它既是重要的工业原料植物,也是一种名贵药用植物,其性味甘、微辛、温、无毒,久服能轻身耐老,延年益寿,是著名的补益类抗衰老中药。自古以来,杜仲以皮人药,新的研究报道表明,杜仲的叶中含有与皮类似的活性药用成分。而其果实、枝条中也含有许多有药用价值的次生代谢产物。这些次生代谢产物主要包括多种木脂类化合物,有单环氧木脂素、双环氧木脂素、环木脂素和新木脂素等:环烯醚帖类化合物有杜仲苷、桃叶珊瑚苷等:含三帖类化合物熊果苷:酚酸类成分有咖啡酸、二氢咖啡酸、松柏酸、愈创木丙三醇、松柏苷、丁香苷、间叛基苯丙酸、绿原酸、绿原酸甲酯、香草酸等。

杜仲的药用部位为树皮,人们采集树皮过程中常造成杜仲树的死亡,同时人类对生态环境的破坏和以及全球气候条件变化的影响,自然条件下和人工栽培的杜仲天其产量和品质不能满足人们对它日益增长的需求。本项目通过植物细胞工程的技术和方法,以杜仲幼苗下胚轴中的为外植体材料,通过能持续分裂的植物干细胞进行分离,通过一定配比的植物激素进行愈伤组织诱导,一般7-10天在外植体切开边缘处会出现膨大疏松的愈伤组织结构,通过连续继代培养获得疏松的杜仲细胞团,建立了一种适合杜仲悬浮细胞生长的培养体系。

项目中通过添加外源茉莉素对杜仲悬浮细胞进行诱导,结果表明在50-100μm浓度的茉莉素能诱导杜仲悬浮细胞中绿原酸和总黄酮的积累,同时比同质量的杜仲原药材中的含量高出30%以上。杜仲细胞提取物抗氧化能力高于杜仲原药材提取物20%以上,同时杜仲细胞提取物色泽澄清可直接添加到化妆品中。该项目的研究有利于杜仲悬浮细胞工厂化生产,能提高及稳定杜仲中功效组分的含量和品质,为提升衰老化妆品品质提供新的功效原料。

本项目的创新点:1、建立了杜仲愈伤组织诱导和悬浮细胞培养体系:2、建立了一种安全的诱导杜仲中绿原酸和总黄酮积累的处理条件。