[00653648]不同配比冷冻保护剂冷冻效果及极微量精子冷冻技术研究

精子库提供的冷冻精液具有使用方便、避免感染病毒的优点,已在临床上得到广泛应用。但目前各类精子冷冻保存的最大缺陷就是解冻后的精子质量不满意,包括活率、活力以及精子DNA 完整性的降低,这主要是由于精子冻融保存过程中渗透压变化、细胞内冰晶形成等均对精子质膜产生影响,导致精子损伤。在正常情况下只有具有前向活动的精子才能使卵子受精,已有研究证实精子的活动力和活动率与精子的生育力明显相关,卫生部对精子库检测质量的一个主要指标就是前向运动精子的百分比。另外,精子顶体酶是受精过程中重要的蛋白水解酶,具有水解卵透明带使精子穿过卵最终与卵子融合的作用,顶体酶活力是判断男性精子功能和生育力强弱的重要评价指标,活力不足可导致不育。而精子形态也是评价男性生育力的一个重要参数,精子畸形率过高,可造成不孕、习惯性流产、胎儿畸形等,精子形态学检测可作为不育患者的一项检查指标。DNA作为精子的遗传物质,其冷冻保存过程的稳定性对后代的健康尤其重要。因此,如何提高冷冻后精子的活动率,顶体酶活力及精子形态并维持精子DNA的稳定性,提供合格优质的标本是当前精子库工作的重点,而冷冻保存技术又是其中的关键。精子冷冻保存技术也一直是生殖医学工作者重点研究的课题之一。 精液冷冻保护剂在冷冻过程中对精子的保护作用也是相当关键的,冷冻保护剂配制的好坏直接影响到复苏精子的质量。一直以来,人们都在不断地探索适宜的冷冻保护剂的配方。目前常用的具有较好保护效果的人类精子冷冻保护剂是甘油复合型。由于各种类型甘油复合型保护剂成分不一,冷冻效果存在差异,因此为了获得冷冻效果更佳的保护剂,本研究将根据经典的冷冻保护剂配方,对其中成分进行了调整。目前,微量精子冷冻技术国外已有研究,但临床报道极少,国内鲜见报道,其主要包括空卵膜冷冻法、麦管冷冻法、显微注射针冷冻法、玻璃化冷冻法及改良微量精子冷冻法,由于该方法的研究可更好地为严重少、弱精患者及睾丸或附睾穿刺患者精液进行冷冻保存。因此,研究一种可大量临床运用的微量精子冷冻技术很有必要。